Nina Hartley rozpoczęła pracę w klubach ze striptizem, chociaż jest dyplomowaną pielęgniarką i znanym seksuologiem.

Pochodzi z żydowskiej rodziny. Do branży trafiła w 1984 roku rolą w filmie "Educating Nina". Od tamtej pory zagrała w ponad 400 filmach dla dorosłych i jest uznawana za najwytrzymalszą aktorkę. Jej pseudonim to "bąbelkowy tyłek" ("bubble butt"). Często gra w scenach biseksualnych z aktorami o różnej narodowości.

Prywatnie jest socjalistką i feministką. Uważa, że seks jest tak samo ważny dla kobiet, jak i dla mężczyzn. Otwarcie broni filmów dla dorosłych. Była w związku uznanym za najdłuższy w tej branży (20 lat), z mężem Dave'em i partnerką Bobby Lilly. Aktualnie jest tylko żoną jednego mężczyzny.